全自動(dòng)凝膠成像儀通過(guò)多維度技術(shù)協(xié)同實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)定量分析,其核心機(jī)制可歸納為光學(xué)系統(tǒng)優(yōu)化、智能對(duì)焦技術(shù)、多模式光源適配及算法驅(qū)動(dòng)的定量分析四大模塊。
光學(xué)系統(tǒng)優(yōu)化是定量分析的基礎(chǔ)。設(shè)備采用高分辨率CCD相機(jī)與電動(dòng)變焦鏡頭組合,配合透射式紫外/白光光源,通過(guò)均勻光場(chǎng)分布消除邊緣光衰減。例如,302nm與365nm雙波長(zhǎng)紫外透射光源可適配不同染料(如EB、SYBRGreen),確保DNA條帶激發(fā)大化,同時(shí)白光透射模式支持考馬斯亮藍(lán)染色的蛋白膠成像,光密度均勻性誤差控制在±2%以內(nèi)。
智能對(duì)焦技術(shù)突破傳統(tǒng)手動(dòng)調(diào)節(jié)局限。設(shè)備集成主動(dòng)式與被動(dòng)式雙模式自動(dòng)對(duì)焦系統(tǒng):主動(dòng)式通過(guò)發(fā)射紅外光并接收反射信號(hào)實(shí)現(xiàn)三角測(cè)距,適用于低反差樣品;被動(dòng)式直接分析樣品自身反光,在逆光或高亮度場(chǎng)景下仍可精準(zhǔn)對(duì)焦。兩者動(dòng)態(tài)切換機(jī)制使對(duì)焦成功率提升至99%,確保條帶邊緣銳度達(dá)像素級(jí)。
多模式光源適配覆蓋全場(chǎng)景需求。除標(biāo)準(zhǔn)紫外/白光外,設(shè)備可選配藍(lán)光激發(fā)模塊(470nm),減少DNA光損傷的同時(shí)降低操作風(fēng)險(xiǎn)?;瘜W(xué)發(fā)光成像模式通過(guò)無(wú)光源暗箱設(shè)計(jì),捕捉ECL等自發(fā)光信號(hào),靈敏度達(dá)0.1fg級(jí),適用于WesternBlot等低豐度蛋白檢測(cè)。
算法驅(qū)動(dòng)的定量分析是精準(zhǔn)度的核心保障。軟件內(nèi)置分子量擬合算法,通過(guò)DNAMarker標(biāo)準(zhǔn)曲線自動(dòng)計(jì)算未知條帶分子量,誤差率<3%。密度定量模塊采用區(qū)域積分法,對(duì)比已知濃度標(biāo)準(zhǔn)條帶光密度值,實(shí)現(xiàn)DNA/RNA片段濃度單點(diǎn)校準(zhǔn)后全泳道定量。PCR定量功能通過(guò)條帶光密度占比分析,可同時(shí)處理多達(dá)16條泳道數(shù)據(jù),生成相對(duì)含量熱力圖。所有計(jì)算過(guò)程均通過(guò)AI算法優(yōu)化,消除人為操作偏差。
該技術(shù)體系使全自動(dòng)凝膠成像儀在分子量測(cè)定、濃度定量及PCR產(chǎn)物分析等場(chǎng)景中,重復(fù)性CV值<5%,為基因編輯、蛋白質(zhì)組學(xué)等前沿研究提供高可信度數(shù)據(jù)支撐。